DGL樹枝狀大分子是一種以賴氨酸為單體,通過縮聚反應形成的高度支化聚合物,屬于樹枝狀大分子家族的重要成員。其結構由內核向外逐層擴展,形成具有明確代數(G1-G5)的樹狀球體,表面富含高密度活性氨基基團,內部存在可調控的納米級空腔。這種獨特結構賦予其精準的分子設計能力,可通過修飾氨基實現功能化,例如連接羧基、磺酸基、PEO等基團,或靶向配體(如抗體、葉酸)以增強生物相容性。
DGL的樹枝狀結構由內核、支化單元和外圍基團組成,代數越高,分子尺寸和表面氨基密度越大。其表面氨基帶正電荷,可與帶負電的物質(如DNA、RNA、蛋白質)通過靜電作用結合,形成穩定的復合物。內部納米級空腔可包載藥物分子,實現物理包封或化學鍵合。此外,DGL的降解產物為人體必需氨基酸(賴氨酸),生物毒性低,可控性高。
一、儲存條件
儲存形式:
凍干粉:通常為白色或類白色粉末,應密封保存于-20°C避光干燥環境,防止吸潮和降解。
溶液:若為液體形式,需根據說明書要求儲存(通常為4°C短期保存,-20°C長期保存),避免反復凍融。
防潮避光:
樹枝狀大分子易吸濕,取用后應立即密封,置于干燥器中。
部分熒光標記或光敏型衍生物需避光保存。
有效期:
注意生產日期和保質期,過期產品可能導致性能下降或毒性增加。
二、溶解與配制
溶劑選擇:
常用溶劑:去離子水、PBS緩沖液、生理鹽水等。
避免使用含高濃度鹽或有機溶劑的溶液,除非已驗證其相容性。
溶解方法:
輕柔渦旋或輕微振蕩助溶,避免劇烈超聲或高速攪拌,以防結構破壞。
可輕微加熱(如37°C)促進溶解,但溫度不宜過高。
濃度控制:
嚴格按照實驗設計或說明書推薦濃度使用。過高濃度可能導致細胞毒性或非特異性聚集。
三、生物實驗使用注意事項
細胞毒性:
陽離子樹枝狀大分子(尤其是高代數G4以上)可能因表面正電荷與細胞膜相互作用而產生細胞毒性。
建議進行細胞毒性預實驗(如CCK-8、MTT),確定安全使用濃度范圍。
血清干擾:
血清蛋白可能與樹枝狀大分子結合,影響其與細胞的相互作用。需根據實驗目的決定是否在含血清培養基中使用。
pH敏感性:
賴氨酸基樹枝狀大分子的電荷狀態受pH影響,可能影響其與核酸(如DNA、siRNA)的復合能力(用于基因轉染時)。
內毒素控制:
若用于細胞或動物實驗,必須確保產品低內毒素(<1 EU/mg),避免引發非特異性免疫反應。
四、操作安全
個人防護:
操作時佩戴手套、口罩和實驗服,避免吸入粉末或接觸皮膚/眼睛。
廢棄物處理:
含樹枝狀大分子的廢液應按照實驗室化學/生物廢棄物處理規程進行收集和處置,不可直接倒入下水道。
五、其他注意事項
批次差異:
不同批次產品可能存在結構均一性、分子量分布差異,建議在關鍵實驗中使用同一批次。
功能化修飾:
若使用表面修飾(如PEG化、靶向配體連接)的DGL,需注意修飾基團的穩定性與活性。
儀器兼容性:
高濃度溶液可能堵塞HPLC或微流控芯片,使用前需過濾(如0.22μm濾膜)。